稀釋疫苗之前應對使用的疫苗逐瓶檢查，尤其是名稱、有效期、劑量、封口是否嚴密、是否破損和吸濕等。對需要特殊稀釋液的疫苗，應用指定的稀釋液。其他疫苗一般可用生理鹽水或蒸餾水稀釋。稀釋液應是清涼的，這在天氣炎熱時尤應注意。稀釋液的用量在計算和稱量時均應細心和準確。稀釋過程應避光、避風塵和無菌操作，尤其是注射用的疫苗應嚴格無菌操作。稀釋過程一般應分級進行，對疫苗瓶應用稀釋液沖洗2～3次。稀釋好的疫苗應盡快用完，尚未使用的疫苗也應放在冰箱或冰水桶中冷藏。
對于液氮保存的馬立克氏病疫苗的稀釋，更應小心，生產(chǎn)廠家有操作程序時，應嚴格按提供的程序執(zhí)行，如無現(xiàn)成的程序，可參考如下的注意事項。
（一）一般性要求
1．液氮保存的疫苗必須有指定的專業(yè)技術(shù)人員負責保管和稀釋。
2．定期測定和登記罐內(nèi)的液氮量，液氮量不足時應及時補充。
3．液氮罐應存放于安全的地方，與宿舍、辦公室、倉庫等保持一定的距離。
4．帶液氮罐領(lǐng)取疫苗時應由專車運送，不得用客運交通工具運送，如需經(jīng)火車等長途運輸，則必須征得有關(guān)部門的同意，并采取相應防范措施后再作運輸。
(二)疫苗的稀釋過程
1．操作者應先戴好防護面具和手套。
2．稀釋液平時應于4℃保存，稀釋前稀釋液溫度應為15～27℃（按廠家規(guī)定辦）。
3．按疫苗廠家的要求，準備好15～27℃的水浴箱（桶）以及長柄鉗1～2支、冰塊、托盤、水桶、自來水、注射器、18號針頭等備用。
4．打開液氮罐，取出一支疫苗后迅速將其余疫苗放回液氮罐內(nèi)。
5．立即將已取出的疫苗放入上述已準備好的溫水浴中，使疫苗迅速解凍。
6．待疫苗完全溶解后，立即取干布拭干，甩動疫苗瓶，使疫苗瓶頸部不含疫苗液。在盡可能遠離操作者面部及身體的地方把疫苗瓶從頸部折斷。
7．取注射器套上18號針頭，抽取溫度為15～27℃之間（按廠家規(guī)定辦）的稀釋液1ml～2ml，再將疫苗液抽入注射器內(nèi)，輕輕混勻后注入稀釋液瓶中，然后再抽取稀釋液連續(xù)沖洗疫苗瓶2～3次，并將沖洗液加入到稀釋液瓶中。
8．輕輕地搖動已加入疫苗的稀釋液，使疫苗均勻地分布在稀釋液中。
9．把稀釋好的疫苗保持在15～27℃（按廠家規(guī)定辦），在注射期間也應保持在這一溫度范圍內(nèi)。
10．已稀釋的疫苗必須在稀釋后一小時內(nèi)用完。
五、疫苗的接種途徑
免疫接種時操作上的失誤，是造成免疫失敗的常見原因之一。不同免疫接種途徑的優(yōu)缺點及注意事項如下。
（一）飲水 飲水免疫避免了逐只抓捉，可減少勞力和應激，但這種免疫接種受影響的因素較多，操作過程應注意：
1．疫苗應是高效的活毒疫苗。
2．使用的飲水應是清涼的，水中不應含有任何能滅活疫苗病毒或細菌的物質(zhì)。
3．在飲水免疫期間，飼料中也不應含有能滅活疫苗病毒和細菌的藥物。
4．飲水中應加入0.1%～0.3%的脫脂乳或山梨糖醇,以保護疫苗的效價。
5．為了使每一只雞在短時間內(nèi)能均勻地攝入足夠量的疫苗，在供給含疫苗的飲水之前2h～4h應停止飲水供應（視環(huán)境溫度而定）。
6．稀釋疫苗所用的水量應根據(jù)雞的日齡及當時的室溫來確定，使疫苗稀釋液在1h～2h內(nèi)全部飲完。
7．飲水器應充足，使雞群2/3以上的雞只同時有飲水的位置。
8．飲水器不得置于直射陽光下，如風沙較大時，飲水器應全部放在室內(nèi)。
9．夏季天氣炎熱時，飲水免疫最好在早上完成。
（二）滴眼滴鼻 滴眼滴鼻免疫接種如操作得當，往往效果比較確實，尤其是對一些預防呼吸道疾病的疫苗，經(jīng)滴眼滴鼻免疫效果較好。當然，這種接種方法需要較多的勞力，也會造成一定的應激，如操作上稍有馬虎，則往往達不到預期的目的。應注意：
1．稀釋液必須用蒸餾水或生理鹽水，最低限度應用冷開水，不要隨便加入抗生素或其他化學藥物。
2．稀釋液的用量應準確，最好根據(jù)自己所用的滴唧或針頭事先滴試，確定每毫升多少滴，然后再計算疫苗稀釋液的實際用量。
3．為使操作準確無誤，一手一次只能抓一只雞，不能一手同時抓幾只雞。
4．在滴入疫苗之前，應把雞的頭頸擺成水平的位置（一側(cè)眼鼻朝天，另一側(cè)眼鼻朝地），并用一只手指按住向地面的一側(cè)鼻孔。
5．在將疫苗液滴加入眼和鼻以后，應稍停片刻，待疫苗液確已被吸入后再將雞輕輕放回地面。
6．應注意做好已接種和未接種禽之間的隔離，以免走亂。
7．為減少應激，最好在晚上弱光環(huán)境下接種，也可在白天適當關(guān)閉門窗后，在稍暗的光線下接種。
（三）肌肉或皮下注射 肌肉或皮下注射免疫接種的劑量準確、效果確實，但耗費勞力較多，應激較大，在操作中應注意：
1．疫苗稀釋液應是經(jīng)消毒而無菌的，不要隨便加入抗菌藥物。
2．疫苗的稀釋和注射量應適當，量太小則操作時誤差較大，量太大則操作麻煩，一般以每只0.2ml～1ml為宜。
3．使用連續(xù)注射器注射時，應經(jīng)常核對注射器刻度容量和實際容量之間的誤差，以免實際注射量偏差太大。
4．注射器及針頭用前均應消毒。
5．皮下注射的部位一般選在頸部背側(cè)，肌肉注射部位一般選在胸肌或肩關(guān)節(jié)附近的肌肉豐滿處。
6．針頭插入的方向和深度也應適當，在頸部皮下注射時，針頭方向應向后向下，與頸部縱軸基本平行。對雛雞的插入深度為0.5cm～1cm，日齡較大的雞可為1cm～2cm。胸部肌肉注射時，針頭方向應與胸骨大致平行，插入深度雛雞為0.5cm～1cm，日齡較大的雞可為1cm～2cm。
7．在將疫苗液推入后，針頭應慢慢拔出，以防疫苗液漏出。
8．在注射過程中，應邊注射邊搖動疫苗瓶，力求疫苗的均勻。
9．應先接種健康群，再接種假定健康群,最后接種有病的雞群。
10．關(guān)于是否一只雞一個針頭及注射部位是否消毒的問題，可根據(jù)實際情況而定。但吸取疫苗的針頭和注射雞的針頭則應絕對分開，盡量注意衛(wèi)生以防止因免疫注射引起傳染病的擴散或引起接種部位的局部感染。
（四）氣霧免疫 可節(jié)省大量的勞力，如操作得當，效果較好，尤其是對呼吸道有親嗜性的疫苗效果更佳，但氣霧也容易引起雞群的應激，尤其容易激發(fā)慢性呼吸道病。氣霧免疫中應注意：
1．氣霧前應對氣霧機的各種性能進行測試，以確定霧滴的大小、稀釋液用量、噴口與雞群的距離（高度）、操作人員的行進速度等，以便在實施時參照進行。
2．疫苗應是高效的。
3．氣霧前后幾天內(nèi)，應在飼料或飲水中添加抗菌藥物，預防慢性呼吸道病。
4．疫苗的稀釋應用去離子水或蒸餾水，不得用自來水、開水或井水。
5．稀釋液中應加入0.1%的脫脂乳或3%～5%甘油。
6．稀釋液的用量因氣霧機及雞群的平養(yǎng)、籠養(yǎng)密度而異，應嚴格按說明書推薦用量使用。
7．嚴格控制霧滴的大小，雛雞用霧滴的直徑為30μm～100μm，成雞為5μm～30μm。
8．氣霧期間，應關(guān)閉雞舍所有門窗，停止使用風扇或抽氣機，在停止噴霧后20min～30min，才可開啟門窗和啟動風扇（視室溫而定）。
9．氣霧時，雞舍內(nèi)溫度應適宜，溫度太低或太高均不適宜進行氣霧免疫，如氣溫較高，可在晚間較涼快時進行。
10．雞舍內(nèi)的相對濕度對氣霧免疫也有影響，一般要求相對濕度在70%左右最為合適。
11．實施氣霧時，氣霧機噴頭在雞群上空50cm～80cm處，對準雞頭來回移動噴霧，使氣霧全面復蓋雞群，使雞群在氣霧后頭背部羽毛略有潮濕感覺為宜。
（五）翼膜刺種 翼膜刺種可用于雞痘疫苗的接種，一般每1 000羽份疫苗用25ml生理鹽水稀釋，用接種針（或注射器）蘸取疫苗稀釋液，在雞翅膀內(nèi)側(cè)無血管的翼膜處刺種，小雞刺一針，大雞刺二針。做翼膜刺種時，一定要確定接種針已蘸取了疫苗稀釋液，使每一只被接種雞接種到足量的疫苗。
（六）滴肛或擦肛 滴肛或擦肛免疫目前只用于強毒型傳染性喉氣管炎疫苗，在對發(fā)病雞群進行緊急預防接種時，可將1 000頭份的疫苗稀釋于25ml～30ml生理鹽水中，將雞抓起，頭向下肛門向上，用接種刷（小毛筆或棉拭子）蘸取疫苗在肛門黏膜上刷動3～4次。接種時應注意只能將疫苗稀釋液擦在肛門上，不能讓疫苗稀釋液碰到雞的皮膚或羽毛或落到地面上，造成環(huán)境污染和疾病的擴散。